다광자 레이저 스캐닝 현미경의 장단점
다광자 레이저 스캐닝 현미경은 레이저 스캐닝 현미경 기술을 기반으로 한 실험 방법으로 3차원 관찰에서 보다 정확한 광학 단면 기능을 제공합니다. 다광자 형광 여기법은 장파장 적색광 또는 근적외선을 이용하여 검체의 고해상도 형광 이미지를 수집하여 살아있는 검체에 대한 손상이 최소화되어 생세포 이미징에 적합하며 특히 다음과 같은 두꺼운 생체 조직에 적합합니다. 뇌 절편, 배아, 전체 장기 또는 전체 유기체의 이미징 연구.
이점은 다음과 같습니다.
1. 적색광 또는 적외선에 의해 여기되면 광 산란이 작습니다(작은 입자의 산란은 파장의 4제곱에 반비례함).
2. 핀홀이 필요하지 않으며 이미징 섹션에서 더 많은 산란 광자를 수집할 수 있습니다.
3. 핀홀은 초점이 맞지 않는 영역 또는 초점 영역에서 방출되는 산란된 광자를 구별할 수 없으며 깊은 층에서 다중 광자 이미징의 신호 대 잡음비가 좋습니다.
4. 단일 광자 여기에 사용되는 자외선 또는 가시광선은 빔이 초점면에 도달하기 전에 샘플에 쉽게 흡수되고 감쇠되며 깊은 층을 여기시키기가 쉽지 않습니다.
5. 생물현미경관찰의 경우 생물체 자체의 활성상태를 손상시키지 않고 물, 이온농도, 산소, 영양분의 순환을 유지하는 것이 우선 고려사항이다. 광 관찰의 경우 열과 광자 에너지 모두 세포를 손상시키지 않는 조사량과 빛 에너지 범위 내에서 유지되어야 합니다.
6. 다광자 현미경은 또한 많은 장점을 가지고 있습니다. 3차원 해상도, 깊은 침투, 산란 효율, 배경 조명, 신호 대 잡음비, 제어 등 과거 레이저 현미경이 가지고 있지 않거나 비교할 수 없는 우수한 특성이 있습니다.
다광자 공초점 레이저 스캐닝 현미경은 다양한 연구 및 응용 분야로 확장되었습니다. 그것은 자연 상태에서 샘플의 3차원 비파괴 관찰을 수행할 수 있으며 시스템의 해상도와 신호 대 잡음비를 향상시킬 수 있습니다. 다광자 여기 재료를 사용하여 3차원 높이 데이터 저장 및 3차원 임의 방향 미세 가공을 실현할 수 있어 응용 가치가 높습니다. 다광자 공초점 현미경과 관련된 기계, 재료 및 레이저 기술의 추가 발전으로 더 많은 광자 공초점 레이저 스캐닝 현미경이 더 발전하고 더 넓은 적용 범위를 갖게 될 것이라고 믿어집니다.
단점은 다음과 같습니다.
1. 형광 이미징 전용.
2. 샘플에 안료와 같이 여기광을 흡수할 수 있는 발색단이 포함되어 있으면 샘플이 열에 의해 손상될 수 있습니다.
3. 해상도가 약간 떨어집니다. 공초점 조리개를 동시에 사용하여 개선할 수 있지만 신호가 손실됩니다.
4. 고가의 초고속 레이저의 한계로 인해 다광자 주사 현미경의 비용이 상대적으로 높습니다.
