공초점현미경과 일반 광학현미경의 비교
현미경은 세포를 관찰하는 주요 도구입니다. 광원에 따라 광학현미경과 전자현미경 두 가지로 나눌 수 있습니다. 전자는 가시광선(자외선현미경~자외선)을 광원으로 사용하고, 후자는 전자빔을 광원으로 사용합니다. 일반 광학현미경과 레이저공초점현미경은 동일한 광학현미경에 속합니다.
I. 일반 광학현미경
일반 생물학 현미경은 세 부분으로 구성됩니다. 즉: ① 광원과 콘덴서를 포함한 조명 시스템; ② 대물렌즈와 접안렌즈로 구성된 광학 배율 시스템은 현미경의 본체이며, 구면수차와 색수차를 제거하기 위해 접안렌즈와 대물렌즈는 복잡한 렌즈군으로 구성됩니다. ③ 기계 장치, 재료를 고정하고 편의성을 관찰하는 데 사용됩니다.
현미경 물체는 배율에 의해 결정될 뿐만 아니라 현미경의 분해능(해상도)에 의해 결정되며, 분해능은 현미경(또는 인간의 눈과 대상의 25cm)이 물체를 구별할 수 있는 능력의 작은 간격을 의미합니다. 분해능의 크기는 빛의 파장, 미러 입률 및 매체의 굴절률에 따라 결정되며 다음 공식으로 표현됩니다.
R=0.61λ /NANA=nsin /2 여기서: n=매질의 굴절률;=거울 입 각도(장력 각도의 대물 렌즈 입에 있는 표본), NA=거울 입 비율(개구수). 거울 입구의 각도는 항상 180°보다 작아야 하므로 sina/2의 zui 값은 반드시 1보다 작아야 합니다.
광학렌즈 제조에 사용되는 유리의 굴절률은 1.65~1.78이며, 사용되는 매질의 굴절률은 유리에 가까울수록 좋습니다. 건식 대물렌즈의 경우 공기의 매체인 거울 입률은 일반적으로 0입니다.05 ~ 0.95; 삼나무 오일을 매체로 하는 오일 렌즈, 거울 입 비율은 1.5에 가까울 수 있습니다.
400~700nm의 일반 빛 파장이므로 현미경 분해능 값은 0.2μm 이상이며 인간의 눈 분해능은 0.2mm이므로 현미경 zui 배율의 일반적인 설계 일반적으로 1000X입니다.
둘째, 레이저 공초점 주사현미경
레이저 공초점 스캐닝 현미경(레이저 공초점 스캐닝 현미경), 레이저를 스캐닝 광원으로 사용하여 점별, 선별, 표면별 빠른 스캐닝 이미징, 스캐닝 레이저 및 공통 대물렌즈의 형광 수집, 대물렌즈 스캐닝 레이저 초점 , 물체 지점의 순간적인 이미징도 가능합니다. 레이저빔의 파장이 짧아 빔이 매우 미세하므로 공초점 레이저 스캐닝 현미경은 일반 광학현미경에 비해 약 3배 높은 해상도를 가지고 있습니다. 시스템은 한 번 초점을 맞추고 스캔은 샘플의 한 평면으로 제한됩니다. 초점 깊이가 동일하지 않은 경우 샘플의 서로 다른 깊이 수준의 이미지를 얻을 수 있으며 이러한 이미지 정보는 컴퓨터 분석 및 시뮬레이션을 통해 컴퓨터에 저장되어 세포 샘플의 3차원 구조를 보여줄 수 있습니다. .
