형광현미경 사용방법 및 주의사항
사용 방법:
(1) 재료 시트를 캐리어 스테이지에 올려 놓습니다.
(2)형광 현미경 전압 조정기를 켭니다. 그런 다음 시작 그룹을 눌러 점화하십시오. UV 램프는 15분 동안 꺼지지 않아야 하며, 꺼진 후 3분 동안 다시 시작되지 않아야 합니다.
(3) 여기 필터를 v로 바꾸고 이색성 필름을 v로 바꾸고 495 또는 475nm 차단 필터를 선택합니다.
(4) uvFL40, uvFL100 형광수신 대물렌즈 현미경을 선택합니다.
(5) 슬라이드에 무형광 오일을 처음에는 40x, 그 다음에는 100x 초점 현미경으로 추가합니다. 형광을 보여줍니다.
(7) 형광물질은 자외선 조사에 의해 형광발현이 시간이 지남에 따라 점차 약해지기 때문에 현미경 관찰시 시야를 자주 바꾸어야 한다.
(8) uvFL10 또는 uvFL20 저배율 현미경 재료(비형광 오일을 첨가하지 않고 저배율 사용)를 사용할 수도 있습니다.
형광 이미지 기록 방법:
형광현미경으로 보는 형광영상은 하나는 형태적 특징, 두 번째는 형광의 색상과 밝기로 결과를 판단함에 있어서 두 가지를 종합적으로 종합적으로 판단해야 합니다. 결과는 주관적인 지표, 즉 작업자의 시각적 관찰에 따라 기록됩니다. 일반적인 정성적 관찰로서 기본적으로 신뢰할 수 있습니다. 기술과 과학의 발전에 따라 다양한 수준에서 객관적인 지표를 사용하여 세포 분광 광도계, 이미지 분석기 및 기타 장비를 사용하여 판단 결과를 기록합니다. 그러나 이러한 장비로 기록된 결과는 주관적인 판단과 결합되어야 합니다.
형광 현미경 사진 기술은 형광 이미지를 기록하는 데 매우 필요합니다. 형광은 퇴색되고 약해지기 쉽기 때문에 사진 촬영 결과를 즉시 기록하기 위해서는 매우 필요합니다. 방법은 기본적으로 일반 현미경검사와 동일합니다. 위의 ASA200 또는 위의 24.와 같은 고속 사진 필름을 사용해야 합니다. FITC 마커 등의 형광에 자외선을 쪼이는 효과가 있기 때문에 30년대 자외선을 조사하면 형광 휘도가 50% 감소합니다. 따라서 형광 이미지를 포착하기에는 노출 속도가 너무 느립니다. 일반 연구 형광 현미경에는 반자동 또는 완전 자동 현미경 사진 시스템 장치가 있습니다.
지침:
(1) 형광현미경 공장 매뉴얼의 요구사항을 엄격히 준수하여 작동하고, 임의로 절차를 변경하지 마십시오.
(2) 검사는 암실에서 실시한다. 암실에 입실한 후 전원을 연결하고 초고압 수은등을 5-15분 동안 점등시킨 후 광원이 강한 빛을 발산하여 안정되고 눈이 암실에 완전히 적응될 때까지 기다린 후, 그런 다음 표본 관찰을 시작합니다.
(3) 자외선으로 인한 눈의 손상을 방지하기 위해 광원 조정 시에는 보호안경을 착용해야 합니다.
(4) 매번 시간을 확인하여 1~2시간이 적절하고 90분 이상일 경우 초고압 수은 램프의 광도가 점차 감소하고 형광이 약해집니다. 표본에 자외선을 3~5분 동안 조사하면 형광도 상당히 약해집니다. 따라서 *는 2~3h를 초과할 수 없습니다.
(5) 형광 현미경 광원 수명은 제한되어 있으므로 시간을 절약하고 광원을 보호하기 위해 표본을 중앙 집중식으로 검사해야 합니다. 뜨거울 때는 팬 냉각을 추가해야 하며, 새 전구는 사용 시작부터 기록해야 합니다. 램프가 꺼지고 다시 사용하려면 전구를 켜기 전에 충분히 식혀야 합니다. 광원은 여러 번 피해야 합니다.
(6) 형광은 시간이 지남에 따라 점차 감소하므로 염색 직후 표본을 관찰하십시오. 시편을 4℃에서 보관하는 폴리에틸렌 비닐봉지에 넣으면 형광이 약해지는 시간을 지연시키고 밀봉제의 증발을 방지할 수 있습니다.
(7) 형광 밝기에 대한 판단 기준: 일반적으로 4가지 수준, 즉 '1' - 형광이 없거나 눈에 보이는 약한 형광으로 구분됩니다. '+' - 투명하게 보이는 형광만 나타납니다. '+ +' - 밝게 보입니다.
