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형광현미경이 레이저 공초점 현미경과 어떻게 다른가요?

Oct 13, 2023

형광현미경이 레이저 공초점 현미경과 어떻게 다른가요?

 

형광현미경
1, 형광 현미경은 자외선을 광원으로 사용하여 검사 대상에 조사하여 형광을 방출 한 다음 현미경으로 대상의 모양과 위치를 관찰하는 것입니다. 형광 현미경은 세포 내 화학 물질의 흡수, 수송, 분포 및 위치를 연구하는 데 사용됩니다. 엽록소와 같은 세포 내 일부 물질은 자외선을 조사한 후 형광을 발할 수 있습니다. 스스로 형광을 낼 수 없는 물질도 있지만, 형광염료나 형광항체로 염색하면 자외선을 조사한 후에도 형광을 낼 수 있는데, 형광현미경은 이런 물질에 대한 정성, 정량 연구 도구 중 하나이다.


2, 형광 현미경 원리:
(A) 광원: 광원은 다양한 파장의 빛(자외선에서 적외선까지)을 방출합니다.


(B) 여기 필터 소스: 표본을 통해 불필요한 빛의 여기를 차단하면서 특정 파장의 빛의 형광을 생성할 수 있습니다.


(C) 형광 표본: 일반적으로 형광 색소로 염색됩니다.


(D) 차단 필터: 검체에 흡수되지 않는 여기광을 차단하여 형광을 선택적으로 투과시키며, 형광 중 일부 파장도 선택적으로 투과시킵니다. 자외선을 광원으로 사용하여 조사된 물체를 형광으로 만드는 현미경입니다. 전자현미경은 1931년 독일 베를린에서 Knorr와 Haroska에 의해 처음 조립되었습니다. 이 현미경은 광선 대신 고속 전자빔을 사용합니다. 전자 흐름의 파장은 광파보다 훨씬 짧기 때문에 전자 현미경의 배율은 최대 800,000 배까지 가능하며 분해능은 최소 한계인 0.2 나노미터입니다. . 1963년 주사전자현미경을 사용하기 시작하면서 물체의 표면에 작은 구조를 볼 수 있게 되었다.


3, 적용 범위: 작은 물체의 이미지를 확대하는 데 사용됩니다. 일반적으로 생물학, 의학, 미세한 입자 및 기타 관찰에 사용됩니다.


공초점 현미경
1, 공초점 현미경은 도로의 반사광과 반반사 반렌즈를 통해 다른 방향으로 접힌 반사광의 렌즈를 통해 핀홀이 있는 배플에 초점을 맞추고 구멍이 위치합니다. 배플 뒤에 있는 초점은 광전 증배관입니다. 이 공초점 시스템 세트를 통해 검출기 빛의 초점 전후에 반사된 빛은 작은 구멍에 초점을 맞출 수 없으며 배플에 의해 차단될 것이라고 상상할 수 있습니다. 따라서 광도계는 초점에서 반사된 빛의 강도를 측정합니다.
 

2, 원리: 전통적인 광학 현미경은 필드 광원을 사용하며, 표본의 각 지점의 이미지는 인접한 지점의 빛의 회절 또는 산란에 의해 간섭됩니다. 레이저 스캐닝 공초점 현미경은 조명 핀홀을 통해 레이저 빔을 사용하여 표본의 각 지점을 스캐닝하는 초점면에서 표본에 점광원을 형성하고 표본을 조사하여 이미징에서 핀홀을 감지합니다. , 광전자증배관(PMT)이나 냉전기결합소자(cCCD)를 점대점 또는 점대점 후의 핀홀을 검출하여 광도계로 빛의 세기를 측정한다. cCCD)는 점 단위 또는 선 단위로 수신하여 컴퓨터 모니터 화면에 형광 이미지를 빠르게 형성합니다. 대물 렌즈의 초점면에 대한 조명 핀홀과 감지 핀홀은 공액이며 초점면의 지점은 동시에 조명 핀홀과 방출 핀홀에 초점을 맞추고 초점면 외부의 지점은 감지 핀홀에 있지 않습니다. 공초점 이미지는 광학 단면의 표본이 되도록 이미징하여 일반 현미경의 흐릿한 이미지의 단점을 극복합니다.
  

3,응용 분야: 의학, 동식물 연구, 생화학, 세균학, 세포 생물학, 조직 발생학, 식품 과학, 유전학, 약리학, 생리학, 광학, 병리학, 식물학, 신경 과학, 해양 생물학, 재료 과학, 전자 과학, 역학, 석유 지질학, 광물학.

 

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