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형광현미경을 사용하는 기술과 방법

Sep 13, 2023

형광현미경을 사용하는 기술과 방법

 

형광 현미경의 기술 매개변수 1. 광각 접안렌즈 2. 무색 대물렌즈 3. 4홀 대물렌즈 변환기 4. 방출 형광 장치 청색(b) 녹색(g) 여기 시스템 100W 수은 램프 5. 동축 거친 마이크로 포커싱 메커니즘: 포커싱 범위 15mm, 마이크로 그리드 값 0.002mm 6. 이중층 기계 작업대의 세로 이동 범위: 70mm, 측면 이동 범위: 50mm.


형광현미경을 사용하는 기술과 방법


(1) 유리 슬라이드
슬라이드의 두께는 0.8-1.2mm에서 1.2mm 사이여야 합니다. 슬라이드가 너무 두꺼우면 한편으로는 많은 빛을 흡수하지 못하고, 다른 한편으로는 여기광이 표본에 모이지도 않게 됩니다. 슬라이드는 매끄럽고 두께가 균일해야 하며 자연발광이 없어야 합니다. Shi Ying 유리 슬라이드가 때때로 필요합니다.


(2) 커버 유리
커버 유리는 약 0.17mm 두께로 매끄러워졌습니다. 여기광을 향상시키기 위해 간섭 커버 유리를 사용할 수도 있습니다. 이는 다양한 빛의 파장에 대해 서로 다른 간섭 효과를 갖는 여러 층의 물질(예: 불화마그네슘)이 포함된 일종의 특수 커버 유리입니다. 형광을 원활하게 통과시키고 여기광을 반사할 수 있으며, 반사된 여기광이 시료를 자극할 수 있습니다.


(3) 시료
조직 단면이나 기타 표본이 너무 두꺼워서는 안 됩니다. 너무 두꺼우면 여기광의 대부분이 시편의 하부에서 소비되고, 대물렌즈로 직접 관찰되는 상부는 완전히 여기되지 않습니다. 또한 셀 중첩이나 불순물 마스킹도 판단에 영향을 미칩니다.


(4) 밀봉제
밀봉제로는 글리세롤이 많이 사용되는데, 자연발광이 없고 무색투명해야 합니다. 형광의 밝기는 pH 8.5~9.5에서 밝으며 빨리 퇴색되기 쉽지 않습니다. 따라서 글리세롤과 0.5 mol/l PH9.0 ~ 9.5 탄산 완충액의 등가 혼합물이 밀봉제로 자주 사용됩니다.


(5) 미러 오일
일반적으로 암시야형광현미경이나 오일거울로 시료를 관찰할 때에는 반드시 미러오일을 사용해야 합니다. 특수한 무형광 미러 오일을 사용하는 것이 가장 좋으며, 위의 글리세린을 대신 사용할 수도 있습니다. 유동 파라핀도 사용할 수 있지만 굴절률이 낮아 화질에 약간의 영향을 미칩니다.

 

2 Electronic microscope

 

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