형광 현미경의 구조 및 주요 부품
형광 현미경은 면역형광 세포화학에서 필수적인 도구입니다. 광원, 필터 플레이트 시스템 및 광학 시스템과 같은 주요 구성 요소로 구성됩니다. 일정한 파장의 빛을 이용하여 시료를 여기시켜 형광을 발산시키고 대물렌즈와 접안렌즈를 증폭시켜 시료의 형광상을 관찰하는 것이다.
형광 현미경의 구조 및 주요 부품
(1) 광원
요즘에는 200W 초고압 수은 램프가 광원으로 많이 사용됩니다. 그들은 석영 유리로 만들어졌으며 가운데가 구형이며 내부에 일정량의 수은이 채워져 있습니다. 작업하는 동안 두 전극 사이의 방전으로 인해 수은이 증발하고 볼의 공기압이 급격히 상승합니다. 수은이 완전히 증발되면 50-70 표준 대기압에 도달할 수 있으며 이 과정은 일반적으로 5-15분 정도 걸립니다. 초고압 수은 램프의 발광은 전극 사이의 방전에 의한 수은 분자의 지속적인 해리 및 환원 동안 광 양자의 방출 결과입니다. 강한 자외선과 청자색광을 방출하는데 이는 각종 형광물질을 여기시키기에 충분하여 형광현미경에 널리 이용된다.
초고압 수은 램프도 많은 열을 방출합니다. 따라서 램프 하우스는 방열 조건이 양호해야 하며 작업 환경 온도가 너무 높지 않아야 합니다.
새로운 초고압 수은 램프는 사용 초기에 고전압 없이 점화될 수 있습니다. 일정 기간 사용 후 고전압(약 15000V)에서 시작해야 합니다. 시동 후 유지 작동 전압은 일반적으로 50-60V이고 작동 전류는 약 4A입니다. 200W 초고압 수은 램프의 평균 수명은 1회 2시간 사용 시 약 200시간입니다. 작업 시간이 짧을수록 수명이 짧아집니다. 20분만 사용하면 수명이 50% 줄어듭니다. 따라서 사용할 때 시작 횟수를 최소화하십시오. 전구를 사용하는 동안 발광 효율이 점차 감소합니다. 표시등이 꺼진 후 다시 시작하기 전에 식을 때까지 기다리십시오. 불완전한 수은 증발로 인해 전극이 손상되지 않도록 점화 직후 전구를 끄지 마십시오. 일반적으로 15분 동안 기다려야 합니다. 초고압 수은 램프의 고압과 강한 자외선으로 인해 전구는 점화되기 전에 램프 챔버에 넣어야 폭발시 눈에 손상을 입히고 작동을 유발하지 않습니다. .
초고압 수은 램프(100W 또는 200W) 광원의 회로와 변압기, 안정기 및 시동을 포함한 여러 부품. 램프 챔버에는 전구의 발광 중심을 조정하는 시스템이 있습니다. 전구 뒤에는 알루미늄 도금된 오목 반사경이 설치되어 있고, 전면에는 집광 렌즈가 설치되어 있습니다.
국산 초고압 수은 램프 GCQ-200는 성능이 좋고 HBO-200와 같은 수입 전구를 대체할 수 있습니다. 평균 수명은 200시간 이상이며 가격은 상대적으로 저렴합니다.
우리나라에서 개발한 간단하고 휴대하기 쉬운 고색온도 브롬 텅스텐 형광 광원 장치는 소형, 경량, 저전력, AC 및 DC 겸용(DC 전원 공급 장치 포함), 휴대가 간편하고 사용이 간편하며 대중화되어 적용되었습니다.
(2) 컬러 필터 시스템
컬러 필터 시스템은 여기 필터 플레이트와 프레싱 필터 플레이트로 구성된 형광 현미경의 중요한 부분입니다. 필터 플레이트 모델과 각 제조업체의 이름이 획일적이지 않은 경우가 많습니다. 필터 플레이트는 일반적으로 기본 색상에 따라 이름이 지정되며 앞의 문자는 색상을 나타내고 뒷면의 문자는 유리를 나타내며 숫자는 모델의 특성을 나타냅니다. 올림푸스 현미경
(3) 대물렌즈
다양한 대물렌즈를 사용할 수 있으나 자가형광이 적고 광투과성(파장대역)이 형광에 적합하기 때문에 무채색 대물렌즈를 사용한다. 현미경 시야에서 이미지의 형광 밝기는 대물렌즈의 개구율의 제곱에 비례하고 그 배율에 반비례하므로 형광 이미지의 밝기를 향상시키기 위해서는 대물렌즈의 조리개 비율을 사용해야 합니다. 특히 고배율에서 그 효과는 매우 분명합니다. 따라서 형광이 불충분한 검체의 경우 접안렌즈는 가능한 한 낮게(4×, 5×, 6.3× 등) 개구율이 큰 대물렌즈를 사용해야 한다.
(4) 거울
반사체의 반사층은 일반적으로 알루미늄 도금인데, 이는 알루미늄이 자외선과 가시광선의 청자색 영역에서 덜 흡수하고 반사율이 90% 이상인 반면 은의 반사율은 70%에 불과하기 때문입니다. 일반적으로 평면 반사경이 사용됩니다.
(5) 콘덴서
형광 현미경용으로 설계된 콘덴서는 석영 유리 또는 기타 UV 투과 유리로 만들어집니다. 클리어 필드 콘덴서와 다크 필드 콘덴서에는 두 가지 유형이 있습니다. 위상차 형광 집중 장치도 있습니다.
(6) 에피라이트 장치
새로운 유형의 에피라이트 장치는 광원에서 나온 빛이 간섭 분광 필터에 닿은 후 필터 코팅의 특성으로 인해 단파장 부분(자외선 및 자청색)이 반사되는 것입니다. 필터가 광원을 향할 때 각도는 45°이다. 필터를 기울이면 대물렌즈를 수직으로 쏘고, 대물렌즈를 통해 시료에 쏘아 시료를 여기시킨다. 이때 대물렌즈는 직접 집광 역할을 한다. 동시에 필터의 긴 부분(녹색, 노란색, 빨간색 등)은 필터에 투명하여 대물렌즈 방향으로 반사되지 않고 필터가 여기 필터판 역할을 하여, 시료의 형광은 가시광선의 장파장 영역에 있기 때문에 필터를 통과하여 접안렌즈에 도달하여 관찰할 수 있으며 배율이 증가함에 따라 형광 이미지의 밝기가 증가하고 투과광보다 강합니다. 고배율 소스. 투과 광원의 기능 외에도 두꺼운 절편, 여과막, 콜로니, 조직 배양 표본과 같은 불투명하고 반투명한 표본을 직접 관찰하는 데 더 적합합니다. 근년에 개발된 새로운 형광현미경은 대부분 epi-형광 현미경이라 불리는 epi-light 장치를 사용한다.
