오일 렌즈의 배율이 일반 대물 렌즈의 배율보다 큰 이유는 무엇입니까?
미생물 실험에서 염색하기 전에 박테리아를 고정해야 하는 이유:
1: 세포를 죽이고 염료로 염색하기 쉽습니다.
2: 박테리아를 유리 슬라이드에 부착시키고 물로 씻어내기가 쉽지 않습니다.
고정할 때는 천천히 건조시켜야 합니다. 정말로 속도를 높이고 싶다면 알코올 램프의 불꽃 위의 거리에서 몇 번 말릴 수 있습니다. 유리 슬라이드가 뜨거워지지 않도록 하십시오. 그렇지 않으면 박테리아의 생명체가 파괴될 수 있습니다.
박테리아의 그람 염색 및 현미경 관찰
1. 실험 원리
그람 염색 원리: 박테리아는 세포벽의 구성과 구조로 인해 그람 염색에 다르게 반응합니다. 그람 양성 박테리아의 세포벽은 주로 펩티도글리칸에 의해 형성된 네트워크 매듭입니다. 에탄올로 처리하면 탈수로 인해 망상구조의 기공크기가 작아지고 투과도가 낮아져 크리스탈 바이올렛-요오드 복합체 물질이 용출되기 어렵고 세포 내 체류가 용이하지 않으며 청색- 1차 염색제의 보라색은 탈색 및 대조 염색 후에도 여전히 유지됩니다. 그람음성균은 세포벽의 펩티도글리칸층이 얇고 지질함량이 높기 때문에 탈색처리를 하면 에탄올(또는 아세톤)에 의해 지질이 용해되어 세포벽의 투과성이 높아지므로 크리스탈 바이올렛-요오드 복합체가 용출되기 쉽고 대비염색으로 대조염색을 한 후 세포가 대조염색의 붉은색으로 염색됩니다. 현미경 이미징 원리: 현대의 일반 광학 현미경은 이미지를 확대하기 위해 접안 렌즈와 대물 렌즈의 두 가지 렌즈 시스템을 사용하므로 종종 복합 현미경이라고 합니다. 현미경의 광학계에서 대물렌즈의 성능이 가장 중요하며 오일렌즈의 배율이 가장 커서 미생물 연구에 가장 중요하다. 유리 슬라이드와 렌즈 사이에 침지유를 첨가하는 주요 목적은 조명의 밝기를 높이고 현미경의 해상도를 높이는 것입니다. 빛의 굴절이나 전반사를 줄이고 관찰한 상을 더 선명하게 하기 위해 공기 대신 오일을 광투과 매체로 사용한다.
2. 실험장비
1. 식민지:
대장균 24시간 영양 한천 사선배양,
황색포도상구균 약 24h 영양한천 사선배양, Bacillus subtilis 12-18h 영양한천 사선배양.
2. 용액 또는 시약:
증류수, 요오드 용액, 크리스탈 바이올렛 염색 용액, 95% 알코올, 사프라닌 염색 용액, 삼나무 오일. 3. 악기:
현미경, 유리 슬라이드, 접종 루프, 알코올 램프, 핀셋, 렌즈 티슈.
3. 실험 단계
a:
1. 얼룩
슬라이드를 꺼내 슬라이드에 불을 붙이고 슬라이드 위의 알코올을 태워 소독한 후 중간에 증류수 한 방울을 떨어뜨린 후 접종루프를 이용해 테스트의 기울어진 배지에 소량의 균을 살며시 골라낸다. 전 과정에서 시험관 입구는 알코올 램프 위에 있어야 하며 배양 배지의 오염을 방지하기 위해 속도가 빨라야 합니다. 그런 다음 작은 물방울을 유리 슬라이드에 원을 그리며 바르고 물방울이 흐려지면 멈추고 마를 때까지 기다리십시오.
2. 1차 염색
콜로니에 크리스탈 바이올렛(세균막을 덮는 것이 적절함)을 떨어뜨리고 1-2분 동안 염색한 후 염색액을 따라내고 용출액이 무색이 될 때까지 슬라이드 위에서 미세한 물로 헹군다. 슬라이드에 얼룩을 놓습니다. 조각에 물기를 털어 내십시오.
3. 매염
요오드용액을 한 방울씩 떨어뜨려 남아있는 물기를 씻어내고 약 1분간 뚜껑을 덮고 물로 씻는다.
4. 탈색
유리 슬라이드 위의 물을 털어내고 유리 슬라이드를 기울여 95% 알코올을 첨가하여 흰색 배경에서 탈색시키고 유출되는 알코올이 파란색으로 보이지 않을 때까지 즉시 물로 알코올을 헹구고 유리 슬라이드를 흔들어 놓습니다. 조각에 물을 끕니다.
5. 대조염색
사프라닌 용액으로 약 1-2분 동안 대비염색하고 물로 씻은 후 흡수지로 물기를 제거합니다.
6. 현미경 검사:
저배율 렌즈 아래에서 관찰할 세균 콜로니를 찾습니다(슬라이드를 계속 움직이며 붉은 그림자가 느껴지면 즉시 정지, 배율 조정, 콜로니가 아니면 계속 찾기), 렌즈 배럴을 올리고, 그런 다음 오일 미러로 전환하십시오. 시료 부위에 삼나무 오일 한 방울을 떨어뜨리고, 오일 렌즈가 오일에 잠기면서 시편에 거의 닿도록 코스 조정기로 렌즈 배럴을 조심스럽게 내립니다. 콘덴서를 가장 높은 위치로 올리고 조리개를 완전히 열고 개체 이미지가 시야에 나타날 때까지 거친 조정기를 사용하여 렌즈 배럴을 천천히 올리고 미세 조정기를 사용하여 명확하고 초점을 맞춥니다.
