현미경 공통 기술 파라미터 및 고유 명사
개구수 NA
개구수 NA는 대물렌즈의 전면렌즈와 시료 사이의 매질의 굴절률(η)에 개구각(u)의 1/2을 곱한 값을 말한다. 관계는 NA=η·sinu/2입니다. 대물 렌즈와 콘덴서 렌즈의 주요 기술 매개 변수입니다. 대물렌즈의 성능을 판단하는 중요한 지표는 대물렌즈 하우징에 표시되어 있습니다.
개구수가 클수록 이미지 품질이 좋아집니다. 개구각은 대물렌즈를 관찰할 때 변경할 수 없으며 NA는 다른 매질의 굴절률 변화에 의해 변경될 수 있습니다. 따라서 파생된 침수식 대물렌즈, 유침식 대물렌즈. 물 η{{0}}.333, 침수 대물 렌즈 NA는 0.1~1.25일 수 있습니다. 삼나무 오일 η=1.515, 오일 침지 대물 렌즈 NA는 0.80~1.45일 수 있습니다. 새로운 고리 브로모나프탈렌 η=1.66, 대물 렌즈 NA 1.40 이상.
개구수는 해상도, 배율 및 이미지 밝기에 정비례하고 초점 심도에 반비례합니다. NA가 증가함에 따라 시야의 폭과 작동 거리가 그에 따라 감소합니다.
해결
해상도는 광점이 이미징 프로세스에서 차이를 나타내는 최소 해상도 거리를 말하며 d{0}}λ/NA로 표현됩니다. 여기서 d는 최소 해상도 거리이고 λ는 광섬유의 파장입니다. NA는 대물 렌즈의 개구수입니다. NA가 클수록 λ는 짧아지고 d는 작아지며 해상도는 높아짐을 알 수 있다. 가시광선 광원은 0.4μm 거리에서 두 개의 물체 지점만 분해할 수 있습니다.
분해능 향상은 4가지 관련 요소에 따라 달라집니다. 1. 더 짧은 파장의 광원을 사용하면 λ가 감소합니다. 2. 굴절률이 높은 매체를 사용하면 η가 증가하고 NA가 증가합니다. 3. 대물 렌즈의 개구각을 더 크게 설계하고 제조하십시오. 4. 이미지의 밝고 어두운 대비를 높이고 이미지 선명도를 향상시킵니다.
얻다
초점 심도
초점의 깊이, 즉 역시 선명하게 관찰되는 시료의 초점면 위아래의 간격 범위를 말한다. 초점 심도가 클수록 샘플의 더 많은 레이어에 초점이 맞춰집니다.
① 초점심도는 총배율, 대물렌즈의 개구수, 영상해상도에 반비례한다. 배율이 높을수록 NA 값이 커지고 초점 심도가 작아지고 해상도가 높아집니다.
② 시료에 의해 준비된 마운팅제와 같은 주변 매질의 굴절률이 증가하고 초점 심도가 커집니다.
시야 폭
시야의 직경이라고도 하는 현미경의 원형 시야에 포함된 샘플의 실제 범위를 나타냅니다. 크기가 클수록 샘플 정보의 양이 많습니다.
① 시야의 폭은 접안렌즈의 시야 수에 비례합니다. 접안 렌즈의 배율이 일정하면 시야 수가 클수록 시야 폭이 커져 관찰에 편리합니다(참고: 시야 수는 시야 폭을 나타냅니다. FN으로 표시되고 접안렌즈의 외피에 표시된 접안렌즈 보기). ②대물렌즈의 배율이 높아져 시야의 폭이 좁아집니다. 즉, 저배율 렌즈 아래에서는 전체 그림이 보이고, 고배율 렌즈 아래에서는 일부만 보인다.
열악한 적용 범위
샘플 커버 유리 두께의 국제 표준은 0.17mm입니다. 이 위상차에 대해 대물 렌즈를 보정하고 케이싱에 표시했습니다. 빛이 비표준 두께의 커버 글라스를 통과하여 공기 중으로 들어갈 때 굴절이 일어나며, 이로 인해 발생하는 위상차를 커버리지 차이라고 합니다.
불량한 적용 범위는 현미경 이미징의 품질에 영향을 미칩니다. 샘플을 관찰할 때 다음 세 가지 사항을 이해해야 합니다.
(1) 배율이 높을수록 NA 값이 커지고 적용 범위 차이가 더 분명해집니다. 커버슬립 두께가 증가함에 따라 불량한 커버리지가 증가하고 초점을 맞추기가 어려워집니다.
(2) 오일 침지 대물 렌즈는 오일과 커버 유리의 굴절률이 모두 1.52로 균일한 광학 시스템을 형성하기 때문에 커버리지 불량 문제가 없습니다.
(3) 대물 렌즈의 NA 값이 클수록 커버 유리 두께의 허용 오차가 작아지고 커버 유리 두께에 대한 품질 요구 사항이 엄격해집니다.
작동 거리
물체 거리라고도 하는 대물 렌즈의 전면 렌즈 표면과 샘플 사이의 거리를 나타냅니다. 관찰시 시료는 대물렌즈 초점거리의 1~2에 있어야 한다. 그것과 초점 거리는 두 가지 개념입니다. 현미경의 포커싱은 실제로 작동 거리를 조정하는 것입니다.
대물렌즈의 개구수(NA)가 일정한 경우 작동거리가 짧아지면 개구각은 커져야 한다. 고배율 대물렌즈의 NA는 크고 working distance는 작아집니다.
미러 밝기 대 필드 밝기
(1) 거울 이미지의 밝기는 이미지의 밝기로 눈으로 관찰되는 이미지의 밝기와 어두움을 나타내며 흐리거나 눈부시거나 피곤하지 않아야 한다.
(2) 시야의 밝기는 현미경 하에서 시야의 명암을 말하며 대물렌즈, 접안렌즈, 광원강도 등 다양한 요인에 의해 영향을 받는다.
거울 밝기와 현미경의 다른 기술적 매개변수 사이의 관계에 대한 두 가지 주요 사항이 있습니다.
(1) 미러 이미지의 밝기는 개구수(NA)의 제곱에 비례합니다. 동일한 조건에서 NA가 큰 대물렌즈의 밝기가 크게 향상됩니다.
(2) 거울상의 밝기는 전체 배율의 제곱에 반비례한다. 같은 조건에서 접안 렌즈의 배율은 증가하고 미러 이미지의 밝기는 감소합니다.
