암시야 현미경의 원리와 작동
① 암시야 현미경은 집광기 중앙에 불투명한 마개가 있습니다. 직접 조명광이 대물렌즈에 들어가는 것을 방지합니다. 표본에 의해 반사되고 회절된 빛만 수집됩니다. 결과적으로, 시야의 배경은 어둡게 나타나고 표본의 가장자리는 밝게 나타납니다. 이 현미경은 일반 명시야 현미경보다 최대 50배 높은 분해능으로 4~200 nm만큼 작은 미세 입자를 확인할 수 있습니다.
② 원리 암시야현미경은 틴들 효과(Tyndall effect)를 기반으로 기존의 광학현미경을 변형한 것이다. 암시야 콘덴서는 광원에서 나오는 중앙 빔을 차단하여 빛이 표본을 통해 대물렌즈까지 똑바로 위쪽으로 이동할 수 없도록 합니다. 대신, 빛이 방향을 전환하여 표본을 비스듬하게 비춥니다. 표본은 입사광을 반사하거나 산란시키고, 산란된 빛은 대물렌즈로 들어가 전체 시야에 걸쳐 어두운 배경을 만듭니다.
③ 적용 범위 암시야 현미경은 염색되지 않은 투명한 표본을 관찰하는 데 일반적으로 사용됩니다. 이러한 표본은 주변 매질의 굴절률과 가까운 굴절률을 가지며 일반 명시야 조명에서는 구별하기 어렵습니다. 암시야 조명은 표본과 배경 사이의 대비를 향상시킵니다. 4~200 nm까지 입자를 감지할 수 있습니다. 그러나 물체의 존재감, 움직임, 표면의 특징만을 보여줄 뿐 미세한 내부 구조를 확인할 수는 없습니다.
④ 운영절차
(1) 암시야 콘덴서를 현미경의 콘덴서 홀더에 장착합니다.
(2) 밝은 광원을 사용하십시오. 대물렌즈에 직접적인 빛이 들어오는 것을 피하세요. 일반적으로 전용 현미경 램프가 사용됩니다.
(3) 콘덴서와 시편 슬라이드 사이에 삼나무 기름 한 방울을 놓습니다. 이는 응축기 표면에서 빛의 내부 전반사를 방지합니다. 그렇지 않으면 암시야 관찰을 위한 표본을 조명하지 못할 수 있습니다.
(4) 콘덴서를 올리거나 내려 원추형 광선을 시편에 집중시킵니다. 콘덴서에 수평 이동 및 센터링 컨트롤이 장착된 경우 먼저 센터링을 수행하여 콘덴서의 광축을 현미경의 광축과 정확하게 정렬합니다. (5) 콘덴서와 일치하는 대물렌즈를 선택하고 초점을 조정한 후 대상 표본 이미지를 표시합니다.
