위상차 현미경이란 무엇입니까?
위상차현미경은 빛이 물체를 통과할 때 발생하는 위상차(또는 광로차)를 진폭(광강도)의 변화로 변환할 수 있는 현미경이다. 주로 살아있는 세포, 염색되지 않은 조직 단면 또는 대비가 부족한 염색된 표본을 관찰하는 데 사용됩니다.
인간의 눈은 가시광선의 파장(색상)과 진폭의 변화만 구별할 수 있고 위상의 변화는 구별할 수 없습니다. 대부분의 생물학적 표본은 매우 투명하며, 광파의 진폭은 통과 후에도 기본적으로 위상 변화만 있을 뿐 변하지 않습니다.
위상차현미경은 기본적으로 시료를 통과하는 가시광선의 광로차를 진폭차로 변환함으로써 다양한 구조물 간의 대비를 향상시켜 선명하고 가시적으로 보이게 한다. 빛은 시료를 통해 굴절되어 원래의 광 경로에서 벗어나 1/4 λ(파장)만큼 지연되고, 더 1/4 λ 증가 또는 감소하면 광 경로 차이는 1/2 λ가 됩니다. 두 개의 광합성 축이 강화되고 진폭이 증가하거나 감소하여 대비가 증가합니다.
구조적 관점에서 위상차 현미경과 일반 광학 현미경의 차이점은 다음과 같습니다.
1. 환형 조리개 광원과 집광기 사이에 설치된 원형 구멍이 있는 다이어프램으로 집광기를 통과하는 빛의 속이 빈 원추형을 형성하여 시료에 초점을 맞춥니다.
2. 위상차 현미경은 대물렌즈 내부에 불화마그네슘으로 코팅된 위상판을 추가하여 직접광 또는 회절광의 위상을 1/4 λ만큼 지연시킵니다. 위상판에는 두 개의 영역이 있는데, 직접광이 통과하는 부분을 "공액면"이라고 하고, 회절광이 통과하는 부분을 "보상면"이라고 합니다. 위상 보드는 작동 효과에 따라 두 가지 유형으로 구분됩니다.
(1) 플러스 위상판: 직사광을 1/4 λ 지연, 두 세트의 광파가 결합된 후 광파의 진폭이 증가하고 표본 구조가 주변 매질보다 밝아져 밝은 대비를 형성합니다. (음의 대비라고도 함).
(2) B 플러스 위상판: 회절광을 1/4 λ만큼 지연시키고, 두 세트의 광선이 합쳐진 후 광파가 줄어들고 진폭이 감소하여 주변 매질보다 더 어두운 표본 구조가 되어 어두운 대비를 형성합니다. (양의 대비라고도 함). 위상판이 있는 대물렌즈를 위상차 대물렌즈라고 하며 대물렌즈의 외부 껍질에 "Ph"라는 단어가 자주 사용됩니다.
