다광자 레이저 스캐닝 현미경의 장점과 단점
다광자 레이저 스캐닝 현미경은 3D 보기에서 보다 정확한 광학 절편 기능을 제공하는 레이저 스캐닝 현미경 기술을 기반으로 한 실험 방법입니다. 다광자 형광 여기법은 장파장의 적색 또는 근적외선을 이용하여 활성 검체의 사멸을 최소화하면서 검체의 고해상도 형광 이미지를 획득하므로 살아있는 세포, 특히 뇌 절편, 배아 등 두꺼운 생체 조직의 이미징에 적합합니다. 전체 기관, 심지어 전체 유기체.
장점은 다음과 같습니다.
1, 적색광 또는 적외선 여기를 사용하면 광 산란이 작습니다 (작은 입자의 산란과 역비의 4 제곱의 파장).
2는 핀홀이 필요하지 않으며 이미징 단면에서 더 많은 산란된 광자를 수집할 수 있습니다.
3, 핀홀은 초점이 맞지 않는 영역이나 초점 영역에서 방출되는 산란된 광자를 구별할 수 없으며 깊은 이미징 신호 대 잡음 비율의 다중 광자는 좋습니다.
4, 샘플이 쉽게 흡수되고 감쇠되기 전에 초점면에 도달하기 위해 빔에 사용되는 자외선 또는 가시광의 단일 광자 여기, 깊은 여기가 쉽지 않습니다.
5, 생물학적 현미경 관찰에서 * 첫 번째 고려 사항은 유기체 자체의 활성 상태를 손상시키지 않고 물, 이온 농도, 산소 및 영양분 순환을 유지하는 것입니다. 빛을 관찰하는 경우에는 조사량, 빛 에너지에 손상을 주지 않고 열 에너지와 광자 에너지가 모두 셀에 유지되어야 합니다.
6, 다광자 현미경에는 많은 장점이 있습니다. 3차원 분해능, 침투 깊이, 산란 효율, 배경광, 신호 대 잡음비, 제어 등 기존 레이저 현미경에는 없는 특성이나 비교할 수 없는 특성이 있습니다.
다광자 공초점 레이저 스캐닝 현미경은 다양한 연구 및 응용 분야로 확장되었습니다. 자연 상태의 시료를 3차원 비파괴 관찰이 가능하며 시스템의 분해능과 신호 대 잡음비를 향상시킬 수 있습니다. 다광자 여기 후 재료 특성의 변화를 이용하면 3차원 높이 데이터 저장과 어느 방향에서든 3차원 미세 가공이 가능해 활용 가치가 높다. 다광자 공초점 현미경과 관련된 기계, 재료, 레이저 기술 및 기타 기술의 추가 개발로 다광자 공초점 레이저 스캐닝 현미경은 더 큰 개발과 더 넓은 적용이 될 것이라고 믿을 수 있습니다.
단점은 다음과 같습니다.
1, 형광 이미징만 가능합니다.
도 2에 도시된 바와 같이, 시료에 색소 등 여기광을 흡수할 수 있는 발색단이 포함되어 있는 경우 시료가 열적으로 손상될 수 있습니다.
3, 공초점 조리개를 동시에 사용하면 해상도가 약간 감소하지만 신호 손실이 발생합니다.
4. 고가의 초고속 레이저의 한계로 인해 다광자 주사 현미경의 비용이 높습니다.
