전자현미경을 위한 생물학적 시료의 준비 및 관찰
현미경의 분해능은 사용되는 빛의 파장에 따라 달라집니다. 1933년 등장한 전자현미경은 가시광선보다 훨씬 짧은 파장의 전자빔을 광원으로 사용해 광학현미경보다 훨씬 높은 해상도를 달성했다. 다양한 광원은 또한 전자현미경과 광학현미경 간의 일련의 차이점을 결정합니다.
전자빔 이미징 원리와 시료에 작용하는 방식의 차이를 기반으로 현대 전자현미경은 다양한 유형으로 발전했습니다. 현재 가장 일반적으로 사용되는 것은 투과전자현미경과 주사전자현미경이다. 전자는 1000-10000000배 사이에서 변할 수 있는 총 배율을 갖는 반면, 후자는 20-300000배 사이에서 변할 수 있는 총 배율을 갖는다. 이 실험에서는 주로 투과전자현미경과 주사전자현미경이라는 두 가지 유형의 현미경 샘플 준비를 소개합니다.
2, 장비
1. 대장균(Escherichia coli) 균주는 기울어져 있습니다.
2. 용액 또는 시약: 펜틸아세테이트, 진한황산, 무수에탄올, 멸균수, 2% 인산텅스텐산나트륨(pH 6.5~8.0) 수용액, 0.3% 폴리비닐포름알데히드(클로로포름에 용해) 용액, 시토크롬c, 아세트산암모늄, 플라스미드 pBR322.
3. 기구 또는 기타 도구에는 일반 광학 현미경, 구리 그물, 도자기 깔때기, 비커, 페트리 접시, 멸균 점적기, 멸균 핀셋, 핀, 유리 슬라이드, 계수판, 진공 코팅 기계, 임계점 건조기 등이 포함됩니다.
3, 작동 단계
(1) 투과전자현미경용 시료의 준비 및 관찰
1. 금속메쉬 처리
관찰을 위해 광학 현미경 샘플을 유리 슬라이드 위에 놓습니다. 그러나 투과형 거울에서는 전자가 유리판을 통과할 수 없기 때문에 메쉬 재료는 일반적으로 캐리어 메쉬라고 불리는 캐리어로만 사용될 수 있습니다. 캐리어 메쉬는 재질과 모양에 따라 다양한 사양으로 구분될 수 있으며, 그 중 200~400 메쉬(구멍 수)의 구리 메쉬가 일반적으로 사용됩니다. 구리 메쉬는 사용하기 전에 처리하여 먼지를 제거하고 깨끗하게 유지해야 합니다. 그렇지 않으면 지지 필름의 품질과 표본 사진의 선명도에 영향을 미칩니다. 본 실험에 사용된 400 메쉬 구리 메쉬는 다음과 같은 방법으로 처리할 수 있습니다. 먼저 펜틸 아세테이트에 몇 시간 동안 담가서 띄운 다음 증류수로 여러 번 헹구고 마지막으로 구리 메쉬를 무수 에탄올에 담가서 띄워서 탈수시킵니다. 위의 방법을 적용한 후에도 구리 메쉬가 여전히 깨끗하지 않은 경우 희석된 진한 황산(1:1)에 1~2분 동안 담그거나 1% NaOH 용액에 몇 분간 끓인 후 증류수로 여러 번 헹구고 무수 에탄올에 탈수하여 나중에 사용할 수 있습니다.
