입체형광현미경 사용 및 주의사항
지침:
(1) 재료 시트를 스테이지에 놓습니다.
(2) 형광 현미경의 전압 안정기를 켭니다. 그런 다음 시작 그룹을 눌러 UV 램프를 점화하고 15분 이내에 끄지 말고 꺼진 후 3분 이내에 다시 시작하지 마십시오.
(3) 여기 필터를 v로, 색 분리 필터를 v로 돌리고 495 또는 475nm 차단 필터를 선택합니다.
(4) 현미경 검사를 위해 uvFL40, uvFL100 형광 대물 현미경을 선택합니다.
(5) 슬라이드에 무형광 오일을 첨가하고 먼저 40배를 사용한 다음 100배 포커싱 현미경을 사용하여 확인합니다. 형광이 나타납니다.
(7) 형광체는 자외선을 조사하면 시간이 지남에 따라 형광이 점차 약해지기 때문에 현미경 관찰 시 시야를 자주 바꾸어 주어야 한다.
(8) uvFL10 또는 uvFL20 저배율 현미경을 사용하여 재료를 검사할 수도 있습니다(저배율 렌즈를 사용할 때 형광 오일을 추가하지 않음).
형광 이미지의 기록 방법:
형광현미경으로 본 형광이미지는 형태학적 특성과 형광색 및 밝기를 모두 가지고 있다. 결과를 판단할 때 이 둘을 종합적으로 판단해야 한다. 결과는 주관적 지표, 즉 작업자의 육안 관찰을 기반으로 기록됩니다. 일반적인 정성적 관찰로서 기본적으로 신뢰할 수 있습니다. 기술과 과학의 발달로 세포 분광 광도계, 이미지 분석기 및 기타 기기와 같은 다양한 수준의 판단 결과를 기록하는 객관적인 지표가 사용됩니다. 그러나 이러한 도구로 기록된 결과는 주관적인 판단과 결합되어야 합니다.
형광 현미경 사진은 형광 이미지를 기록하는 데 매우 필요합니다. 형광은 색이 바래고 약해지기 쉽기 때문에 결과를 실시간으로 기록해야 합니다. 방법은 기본적으로 일반 현미경 사진과 동일합니다. ASA200 이상 또는 24. 이상과 같은 고속 감광성 필름을 사용해야 합니다. 자외선은 FITC 마커와 같이 형광 소광에 강한 영향을 미치기 때문에 30초 동안 자외선을 조사하면 형광 밝기가 50% 감소합니다. 따라서 노출 속도가 너무 느리면 형광 이미지를 촬영할 수 없습니다. 일반 연구용 형광 현미경에는 반자동 또는 완전 자동 현미경 사진 시스템 장치가 있습니다.
지침:
(1) 형광 현미경 공장 지침의 요구 사항에 따라 엄격하게 작동하고 임의로 프로그램을 변경하지 마십시오.
(2) 검사는 암실에서 실시한다. 암실에 들어간 후 전원을 연결하고 초고압 수은등을 5-15분 동안 켜십시오. 광원의 강한 빛이 안정되면 눈이 암실에 완전히 적응한 다음 표본을 관찰하기 시작합니다.
(3) 자외선에 의한 눈의 손상을 방지하기 위하여 광원을 조정할 때에는 보호안경을 착용하여야 한다.
(4) 점검시간은 매회 1-2시간이 바람직하다. 90분을 초과하면 초고압 수은 램프의 광도가 점차 감소하고 형광이 약해집니다. 시료에 3-5분 동안 자외선을 조사한 후 형광도 상당히 약해집니다. 따라서 최대 2-2시간을 초과해서는 안 됩니다. 3시.
(5) 형광현미경의 광원의 수명은 한정되어 있으며 시료를 일괄적으로 검사하여 시간을 절약하고 광원을 보호하여야 한다. 날씨가 더울 때는 열을 분산시키기 위해 팬을 추가해야 하며 새 전구는 사용 시간을 처음부터 기록해야 합니다. 램프가 꺼진 후 다시 사용하려면 전구가 충분히 식을 때까지 기다렸다가 켜십시오. 하루에 여러 번 광원을 비추지 마십시오.
(6) 시간이 지남에 따라 형광이 점차 약해지기 때문에 염색 직후 검체를 관찰하십시오. 시료를 4℃의 폴리에틸렌 비닐백에 보관하면 형광약화시간을 지연시킬 수 있고 마운팅제의 증발을 방지할 수 있다.
(7) 형광 밝기의 판단 기준: 일반적으로 4단계 즉, "1" - 형광이 없거나 약한 것으로 판단됩니다. " plus " - 명확하게 보이는 형광만 볼 수 있습니다. " plus plus " - 눈에 잘 띄고 밝음
