레이저 공초점 현미경과 기존 광학 현미경의 차이점
레이저 스캐닝 공초점 형광 현미경은 컴퓨터, 레이저 및 이미지 처리 기술을 사용하여 생물학적 샘플의 3차원 데이터를 얻는 비교적 진보된 분자 및 세포 생물학 분석 장비입니다. 주로 살아있는 세포의 구조와 특정 분자 및 이온의 생물학적 변화를 관찰하고 정량 분석 및 실시간 정량 결정에 사용됩니다.
레이저 공초점 현미경의 원리: 광원 뒤에 배치된 조명 핀홀과 검출기 앞에 배치된 감지 핀홀을 사용하여 포인트 조명 및 포인트 감지를 실현합니다. 조명 핀홀을 통해 광원에서 방출된 빛은 시료의 초점면에 있는 한 지점에 집속되고 이 지점에서 방출된 형광은 검출 핀홀에 결상되며 이 지점 외부에서 방출된 빛은 검출에 의해 차단됩니다. 핀 홀. 조명핀홀과 검출핀홀은 조사점 또는 검출점과 공역이므로 검출점이 공초점이고 검출점이 위치한 면이 공초점면이다.
컴퓨터는 이미지 점의 형태로 컴퓨터 화면에 감지된 점을 표시합니다. 완전한 이미지를 생성하기 위해 광학 경로의 스캐닝 시스템은 샘플의 초점면을 스캔하여 완전한 공초점 이미지를 생성합니다. 스테이지가 Z축을 따라 위아래로 이동하는 한 샘플의 새 레이어가 공초점 평면으로 이동하고 샘플의 새 레이어가 모니터에 이미징됩니다. Z축의 지속적인 움직임으로 샘플의 여러 층에 대한 연속 이미지를 얻을 수 있습니다. 라이트 컷 이미지.
전통적인 광학 현미경의 차이점
전통적인 형광 현미경에는 극복할 수 없는 단점이 있습니다. 초점면 외부의 형광 구조가 흐려지고 흐려집니다. 그 이유는 대부분의 생물학적 표본이 중첩 구조를 가지고 있기 때문입니다. 형광 표지된 구조가 서로 다른 레벨로 분포되고 겹치면 초점면 위 또는 아래에서 산란된 형광도 대물 렌즈에 수신되어 형광 현미경의 해상도가 크게 향상됩니다. 줄이다.
레이저 스캐닝 공초점 현미경은 전통적인 광학 현미경을 기반으로 레이저 광을 광원으로 사용하고 공액 초점 원리 및 장치를 채택하고 컴퓨터를 사용하여 관찰 대상의 디지털 이미지 처리, 관찰, 분석 및 출력을 수행합니다. 세포의 3차원 공간 구조를 비파괴적으로 관찰하고 분석하기 위해 샘플을 단층 촬영하고 이미지화할 수 있습니다. 동시에 면역형광 표지 및 이온형광 표지 프로브를 이용하여 고정된 세포 및 조직 절편을 관찰할 수 있을 뿐만 아니라 살아있는 세포의 구조, 분자, 이온 및 생명활동에 대한 실시간 동적 관찰 및 검출이 가능하며, 세포 이하 수준에서 Ca2 플러스, pH 값, 막 전위 및 세포 형태의 변화와 같은 생리학적 신호를 관찰하는 것은 형태학, 분자 세포 생물학, 신경 과학, 약리학 및 유전학 분야에서 차세대 강력한 연구 도구가 되었습니다.
