일반적으로 사용되는 두 가지 현미경 관찰 방법
1, 암시야 관찰
암시야는 실제로는 암시야 조명입니다. 조명하는 빛을 직접 관찰하지 않고 검사 대상의 반사광 또는 회절광을 관찰하므로 명시야와는 특성이 다릅니다. 따라서 시야는 어두운 배경이 되고 검사 대상은 밝은 이미지를 나타냅니다.
암시야의 원리는 강한 빛에 의한 회절로 인해 먼지 입자가 강한 빛에 노출되면 사람의 눈으로 관찰할 수 없는 광학적 틴들 현상(Tyndall 현상)을 기반으로 합니다. 먼지 입자에 빛을 비스듬히 비추면 빛의 반사로 인해 입자의 부피가 커지는 것처럼 나타나 사람의 눈에 보이게 됩니다.
암시야 관찰에 필요한 특별한 부속품은 암시야 스포트라이트입니다. 그 특징은 빛의 광선이 대상물을 아래에서 위로 통과하는 것을 허용하지 않고 빛의 경로를 대상물을 향해 비스듬히 향하도록 변경하여 조명광이 대물렌즈에 직접 입사하지 않고 검사 대상물의 표면에서 반사 또는 회절광이 형성하는 밝은 상을 이용한다는 것입니다. 암시야 관찰의 해상도는 명시야 관찰보다 훨씬 높아 0.02-0.004
2, 위상차 거울 검사 방법
광학 현미경의 발전에 있어 위상차 현미경의 성공적인 발명은 현대 현미경 기술의 중요한 성과입니다. 우리는 인간의 눈이 광파의 파장(색상)과 진폭(밝기)만을 구별할 수 있다는 것을 알고 있습니다. 무색 투명한 생체시료의 경우 빛이 통과할 때 파장과 진폭의 변화가 크지 않아 명시야에서 관찰하기 어렵다.
위상차현미경은 검사 대상물의 광로 길이의 차이를 거울 검사에 이용하고, 빛의 간섭 현상을 효과적으로 활용하여 사람의 눈으로 식별할 수 없는 위상차를 식별 가능한 진폭차로 변환합니다. 무색 투명한 물질이라도 선명하게 보일 수 있어 살아있는 세포의 관찰이 매우 용이하므로 위상차현미경은 도립현미경에 널리 사용됩니다.
위상차 현미경의 기본 원리는 시료를 통과한 가시광선의 광로차를 진폭차로 변환함으로써 다양한 구조 간의 대비를 향상시켜 선명하고 가시적으로 만드는 것입니다. 시료를 통과한 후 빛이 굴절되어 원래의 광로에서 벗어나 1/4 λ(파장)만큼 지연됩니다. 광로차를 1/4 λ 더 늘리거나 줄이면 광로차는 1/2 λ 가 되며, 축이 결합된 후 두 광선 사이의 간섭이 증가하거나 감소하여 대비가 향상됩니다. 구조적으로 위상차 현미경은 두 가지를 가지고 있습니다.
일반 광학현미경과의 특별한 차이점:
1. 환형 다이어프램은 광원과 집광기 사이에 위치하며 그 기능은 집광기를 통과하여 시료에 초점을 맞추는 빛의 속이 빈 원뿔을 형성하는 것입니다.
2. 각위상판: 대물렌즈에 불화마그네슘으로 코팅된 위상판을 첨가하여 직접광 또는 회절광의 위상을 1/4 λ만큼 지연시킬 수 있습니다. 두 가지 유형으로 나눌 수 있습니다.
(1) . A+위상판: 직사광을 1/4 λ만큼 지연시키고 축을 결합한 후 두 세트의 광파를 추가합니다. 진폭이 증가하고 표본 구조가 주변 매체보다 밝아져 밝은 대비(또는 음의 대비)를 형성합니다.
(2) . B+위상판: 회절된 빛을 1/4 λ만큼 지연시키고 두 세트의 광선 축을 결합한 후 광파를 빼면 진폭이 감소하고 어두운 대비(또는 양의 대비)가 형성됩니다. 구조가 주변 매체보다 어두워집니다.
