광학 현미경 검사를 위한 샘플 요건은 무엇입니까?
광학 현미경의 샘플 준비 과정에서 샘플 슬라이스의 두께는 2에서 25um 사이입니다. 전자현미경의 슬라이스 두께는 50-100nm 이내(고전압 전자현미경을 제외하고 샘플의 두께는 1um에 도달할 수 있음)에 사용되는 슬라이스 방법이 모두 동일하지는 않습니다.
캐리어 측면에서 광학 현미경 섹션의 캐리어는 유리 슬라이드이고 전자 현미경 섹션의 캐리어는 캐리어 그리드입니다.
고정의 경우 광학현미경 단면은 복합고정제로 고정하고, 전자현미경 단면은 단일고정제로 반복 고정한다.
염색 측면에서 광학 샘플의 염색은 비교적 간단합니다. 다른 관찰 샘플과 광학 현미경의 유형에 따라 일반적으로 약간의 고정 얼룩을 사용하면 충분합니다. 전자 현미경 샘플을 다시 염색하는 방법에는 여러 가지가 있으며 네거티브 염색,은 염색 등과 같이 매우 복잡합니다.
Embedding 측면에서 파라핀, 콜로디온, 젤라틴 등은 광학 현미경 섹션의 포매제로 사용됩니다. 에폭시 수지, 폴리스티렌 수지, 이소부틸렌 수지 및 수용성 수지는 전자현미경 섹션의 포매제로 사용됩니다.
현미경의 시야가 균일하고 충분한 조명을 받기 위해서는 현미경을 처음 설치하고 디버깅할 때 조명 광학 경로 시스템을 조정해야 합니다. 요구 사항. 또한 조명 광경로계의 조정을 정확히 파악하는 것은 현미경을 사용하는 과정에서 전구를 교체한 후 필요한 단계이며, 현미경의 성능을 수시로 테스트하기 위해 필요한 수단이기도 하다. 매일 사용 과정. 현미경 조명 광학 경로 시스템의 조정은 주로 다음 4 항목을 포함합니다. 1. 현미경 외부 광원 램프 챔버의 예비 조정 ① 먼저 램프 챔버의 껍질을 열고 할로겐 전구를 눌러 소켓에 넣습니다. 스프링 클립. 전구에 지문과 같은 먼지가 남아 있으면 전구의 수명에 영향을 미칩니다. ②램프룸을 테이블 위에 놓고 전원을 켠 후 특수 드라이버를 사용하여 램프의 초점 손잡이 구멍("←→" 표시)을 조정하여 필라멘트가 벽에 투사되도록 합니다1-2 m 떨어져 필라멘트 이미지가 조정됩니다. 그런 다음 램프의 높이를 조정하여 필라멘트 구멍("──" 표시)을 조정하여 필라멘트 위치를 적절하게 만듭니다. 그런 다음 램프의 좌우 위치 조정 나사 구멍("──" 표시)을 조정하여 필라멘트의 좌우 위치를 적절하게 만드십시오.
2. 현미경에서 광원 조명기(필라멘트)의 위치를 검사하고 수정하는 목적은 조명기의 이미지 끝을 대물 렌즈의 시야로 조정하고 시야가 확보되도록 하기 위함입니다. 현미경의 빛은 광원의 관점에서 완전하고 균일하게 받아들입니다. Kühler 조명 시스템을 조정하기 위한 전제 조건인 조명. 필요한 기본 도구: 센터링 망원경은 현미경 구매 시 장착됩니다. ① 램프 하우스의 반투명 유리 슬리브를 뽑고 램프 하우스를 현미경에 다시 끼웁니다. ② 10× 대물 렌즈를 선택하고 광원 프로그램을 켜서 샘플을 찾아 초점을 명확하게 조정한 다음 40× 대물 렌즈를 사용합니다. 샘플을 명확하게 초점을 맞추는 렌즈(40× 대물 렌즈 필라멘트의 전체 그림을 선명하게 볼 수 있음); ③ 개구 조리개와 집광기의 필드 조리개를 모두 최대로 엽니다. ④ 접안 렌즈 중 하나를 뽑고 센터링 망원경으로 교체하고 흰색 부분을 잡고 다른 손으로 검은 색 접안 렌즈를 확장하면 시야에서 필라멘트 이미지를 볼 수 있습니다. ⑤필라멘트 위치가 맞지 않을 경우 "──" 홀을 조정하여 필라멘트 이미지를 수평방향으로 조정하고 "──" 홀을 조정하여 수직방향으로 필라멘트 이미지를 원형으로 조정합니다. 대물 렌즈의 조리개를 막 채우는 이미지; ⑥ 조정 후 반투명 유리 슬리브를 원래 위치로 다시 삽입하고 센터링 망원경의 플러그를 뽑은 다음 다음 조정을 위해 접안 렌즈를 교체하십시오. 위에서 언급한 현미경 외부 조명 광원 램프실의 조정과 현미경 내부 광원 조명기의 위치 교정은 현미경을 처음 설치하고 디버깅할 때만 수행하면 되며 전구는 대체되었습니다. 혼란스러운 경우 위의 단계에 따라 원래 상태로 복원할 수 있습니다.
3. Kohler 조명(Kohler) 시스템의 올바른 조정 현미경의 올바른 조정, 주요 작업 중 하나는 조명 광경로 시스템의 조정이며 핵심은 Kohler 조명 시스템의 조정입니다. 현미경을 사용하는 모든 사람, 특히 현미경 사진을 찍는 사람은 Kühler 조명 시스템의 원리와 조정 단계를 어느 정도 이해하고 숙달해야 현미경의 기능을 최대한 활용할 수 있습니다. 결과 사진은 보다 일관되고 완벽할 수 있습니다. Kühler 조명 시스템의 원리는 간단합니다. 광원 조명기의 모든 지점에서 방출되는 빛은 현미경의 시야를 비출 수 있으며 광원 조명기의 각 지점에서 방출되는 빛은 수집됩니다. 현미경의 시야. 매우 충분하고 균일한 조명이 달성됩니다. Kuhler 조명 시스템을 조정하는 목적은 관찰된 시야에 대해 균일하고 충분한 조명을 얻고 미광이 이미징 시스템에 영향을 미치거나 방해하는 것을 방지하여 사진 촬영 중에 네거티브에 안개가 형성되는 것을 방지하는 것입니다. 고도 조정 Kühler 조명 시스템의 필수 구성 요소: 필드 다이어프램, 축상 조정이 있는 콘덴서 시스템. ① 대물렌즈 10× 접안렌즈 10× 선택 ② 집광기 전면 렌즈를 광경로에 놓고 조리개 조리개를 적당한 위치(너무 크지도 작지도 않게)로 조정한 다음 집광기를 올립니다. 콘덴서 턴테이블을 명시야 "J" 위치로 조정 ③ 필드 다이어프램을 최소(0.1)로 조정
④ 봉인된 생체시료를 무대 위에 올려놓고 광원을 켜고 초점을 선명하게 맞춘다.
⑤ 시야각에 국부적으로 조명이 비치는 부분이나 밝은 점이 나타나며, 이는 시야각의 흐릿한 이미지로 샘플의 세부 사항을 명확하게 볼 수 있습니다. 샘플의 세부 사항을 명확하게 확인하십시오.
⑥ 콘덴서를 약간 낮추어 시야의 밝은 부분이 점차 좁아지고 점차 선명한 다각형 이미지, 즉 필드 다이어프램의 선명한 이미지가 되도록 합니다.
⑦ 정상적인 상황에서 다각형 이미지는 시야의 중앙에 있지 않습니다. 시야의 다각형 이미지를 중앙 위치로 조정하려면 콘덴서의 한 쌍의 센터링 나사를 조정해야 합니다.
⑧ 시야 조리개를 서서히 열어 다각형 이미지가 시야의 내접 다각형이 되도록 하고 정렬 상태를 추가로 확인합니다. 정렬이 이상적이지 않으면 계속해서 정렬 나사를 약간 조정하십시오.
⑨ 필드조리개를 살짝 열어 시야의 가장자리에서 다각형 이미지가 사라지도록 합니다. 이 시점에서 Kühler 조명 시스템의 조정이 완료됩니다. Kühler 조명 시스템을 조정한 후 전체 시야가 고르게 조명되었고 현미경 사진은 정상 대비로 밝고 선명했습니다.
